固相抽出（SPE）による合成ワークアップ

固相抽出（SPE）による合成ワークアップ

固相抽出（SPE）は96ウェルプレートもしくはカラムを用いたフロースルー技術です。溶液中に含まれるターゲット化合物の選択的な回収（キャッチ＆リリースSPE）や、不純物の除去（スカベンジングSPE）が可能です。図1に一般的なSPEカラムを示します。

化合物は、イオン性、または極性、非極性の結合力で充填剤に保持されます。レジン試薬と異なり、SPEと化合物の相互作用は比較的、非特異的で可逆的であり、充填剤と化合物の特異的な反応は起こりません。SPEカラムやSPE 96wellプレートはキャッチ＆リリースSPEとスカベンジングSPEの両方に使用することが出来ます。

キャッチ＆リリースSPEでは、カラム充填剤は不純物の中に含まれる目的の化合物を捕らえます。カラムもしくはウェルを洗浄して不純物を取り除いた後、次の溶出操作で適切な溶媒を用い、目的の化合物を溶出させます。

スカベンジングSPEでは、カラム充填剤はサンプル溶液中の不純物を捕らえ、ターゲット化合物を素通りさせます。不純物は充填剤との相互作用によりカラムにとどまり、ターゲット化合物の単離が行われます。

SPEのカラムには様々なサイズと形状があります。伝統的なシリンジタイプの形状のものは使いやすく、VacMaster-20を使用すれば一度に20サンプルまで同時に操作が可能です。多くのサンプルを処理するには、タブがないSPEカラム（タブレスカラム）をISOLUTE Array 24サンプル処理マニホールドを使用して処理すると便利です。さらに多くのサンプルを処理する場合には、ウェル固定プレート（96ウェル）やモジュール式のアレイウェルプレートもあります。

SPEによって単離される物質の量は充填剤の能力に依存します。一般的な例では、非極性SPEカラムは充填剤の重量に対して、およそ5％重量の物質を保持できます（たとえば、1ｇの充填剤は50mgの目的化合物/不純物を保持できます）。イオン交換SPEカラムの能力は、充填剤1ｇに対するmilliequivatens（meq）で測定することができます。0.6meq/gの能力を持つ500mgの強陽イオン交換充填剤（スルホン酸系）を詰めたSPEカラムの場合、250g/molの分子量を持つ最大70mgの陰イオン化合物を保持することができます。

バイオタージのISOLUTE SPEカラムと96ウェルプレートの材質はポリプロピレン、フリットはポリエチレンです。いずれも溶媒に対して強い耐性を持ち、かつ一般的な充填剤、酸や塩基にも対応します。

SPEカラムとプレートはマニュアル処理によるバキュームや、自動化システムでの処理が可能です 。

正しくISOLUTE SPEカラムをお使い頂くためのガイドです。

カラム操作

1. 特にイオン交換操作において、あまり速くSPEカラムに溶液を注入しないでください。極端に速い流速で溶媒を注入すると、目的化合物が充填剤から離れてしまいます。適切な流速で通液してください。
2. ろ過などで、微粒子の除去を行い、カラムの詰まりを防いでください。処理の前に、ターゲット化合物が微粒子に吸着していないことを確認してください。

SPEカラムの選択ガイド